第三军医大学学报 /oa <p> 长链非编码RNA Rpph1对高糖培养的肾小球系膜细胞炎症因子表达的影响</p> /oa/darticle.aspx?type=view&id=201808070 <p> 目的&nbsp;&nbsp;&nbsp; 探讨长链非编码RNA (long non-coding RNA,lncRNA) Rpph1对糖尿病肾病(diabetic nephropathy,DN)肾小球系膜细胞炎症因子的影响。方法&nbsp;&nbsp; 采用荧光原位杂交(fluorescence in situ hybridization, FISH)检测Rpph1细胞定位,实时定量PCR (quantitative real-time PCR,qRT-PCR)检测Rpph1在DN小鼠肾脏组织和系膜细胞中的水平;生物信息学技术预测Rpph1的编码蛋白能力。构建Rpph1的过表达质粒,并设计合成Rpph1的siRNAs,用qRT-PCR验证其转染效率。在高糖培养的肾小球系膜细胞中转染Rpph1siRNA;在低糖培养的肾小球系膜细胞中转染Rpph1过表达质粒,通过Western blot检测转染Rpph1的siRNA和过表达Rpph1后肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor &alpha;,TNF-&alpha;)以及单核细胞趋化蛋白-1(macrophage cationic peptide 1,MCP-1)的表达情况。结果&nbsp;&nbsp;&nbsp; 与正常小鼠比较,Rpph1在DN小鼠肾脏组织中显著上调(P&lt;0.01);同样,高糖培养的系膜细胞中Rpph1表达较低糖培养的系膜细胞显著上调(P&lt;0.01),其主要定位于系膜细胞的细胞质。此外,生物信息学证实Rpph1不具有编码蛋白的能力。且过表达Rpph1后炎症相关因子TNF-&alpha;和MCP-1的水平明显上调(P&lt;0.05);在下调Rpph1后,炎症相关因子TNF-&alpha;和MCP-1的表达也随之下降(P&lt;0.05)。结论&nbsp;&nbsp;&nbsp; 在DN小鼠肾脏组织和高糖环境下的系膜细胞中lncRNA Rpph1显著高表达,且增强炎症相关因子的表达。Rpph1可能与糖尿病肾病炎症的发生相关。</p> 2020年08月14 02:02 2019年第01期 33 40 1739727 <p> 张攀扬,孙艳,彭睿,彭惠民,张政</p> <p> lncRNA-Gm4419对高糖培养的肾小球系膜细胞增殖和纤维化的影响</p> /oa/darticle.aspx?type=view&id=201608102 <div> 目的 &nbsp; &nbsp; &nbsp;探讨长链非编码Gm4419对高糖培养的小鼠肾小球系膜细胞增殖和纤维化的影响。方法 &nbsp; &nbsp; &nbsp;荧光定量PCR检测Gm4419在糖尿病肾病肾脏组织及高糖培养的肾小球系膜细胞中的表达水平。设计合成Gm4419 siRNA,同时构建pcDNA3.1(+)-Gm4419过表达质粒,并将Gm4419 siRNA和pcDNA3.1(+)-Gm4419过表达质粒分别转染至高低糖培养的肾小球系膜细胞,EdU法检测转染后细胞的增殖能力;Western blot检测肾脏纤维标记蛋白的表达水平情况。结果 &nbsp; &nbsp; &nbsp;Gm4419在糖尿病肾病肾脏组织及高糖培养的肾小球系膜细胞中的表达水平较正常组及低糖组显著增高(P&lt;0.01)。荧光定量PCR筛选出一条最佳干扰Gm4419的siRNA,转染高糖组后,与高糖mock组或对照组比较,高糖Gm4419 knockdown组细胞增殖能力减弱、纤维化标记蛋白表达减少(P&lt;0.05)。此外,将酶切和测序结果证实构建成功的pcDNA3.1(+)-Gm4419过表达质粒转染至低糖组细胞,与低糖mock组或对照组相比,低糖Gm4419过表达组细胞增殖能力增强、纤维化标记蛋白表达水平增高(P&lt;0.05)。 结论 &nbsp; &nbsp; &nbsp;lncRNA-Gm4419参与糖尿病肾小球系膜增生和纤维化的调节。</div> 2020年08月14 02:02 2017年第03期 216 222 2259390 <p> 易红,彭睿,孙艳,罗勇军,彭惠民,李爱玲,张政</p> <p> 广东省清远地区人群&alpha;-地中海贫血基因型及临床表型特点</p> /oa/darticle.aspx?type=view&id=201609192 <p> 目的分析2014-2015年广东省清远地区5 063例疑诊地中海贫血样本中&alpha;地贫基因型分布及其临床特点。方法采用单管多重聚合酶链反应法结合跨越断裂点PCR(gapPCR)检测人群基因组DNA样本中3种&alpha;珠蛋白基因缺失--SEA、-&alpha;3.7、-&alpha;4.2;采用PCR反向点杂交法(PCRRDB)技术检测3种常见的&alpha;珠蛋白基因突变&alpha;WS&alpha;、&alpha;CS&alpha;、&alpha;QS&alpha;。结果5 063例受检标本中,检出&alpha;地贫基因1 735例,基因携带率为34.27%。&alpha;珠蛋白基因缺失型&alpha;地贫为1 598例(92.10%),其中以东南亚杂合子--SEA/&alpha;&alpha;基因型最常见(1 265例,72.91%),其次为右缺失型杂合子-&alpha;3.7/&alpha;&alpha;(233例,1343%)和左缺失型杂合子-&alpha;4.2/&alpha;&alpha;(97例,5.59%),而纯合子-&alpha;4.2/-&alpha;4.2为2例,双重杂合子-&alpha;3.7/-&alpha;4.2为1例。非缺失型&alpha;地贫为80例(4.61%),包括&alpha;&alpha;WS/&alpha;&alpha; 37例、&alpha;&alpha;QS/&alpha;&alpha; 22例、&alpha;&alpha;CS/&alpha;&alpha; 20例及&alpha;&alpha;WS/&alpha;&alpha;CS 1例。另外,双重杂合子-&alpha;3.7/&alpha;&alpha;WS 3例。血红蛋白H病(Hb H)为54例(311%),包括--SEA/-&alpha;3.7 33例、--SEA/-&alpha;4.2 16例、--SEA/&alpha;&alpha;WS 4例、--SEA/&alpha;&alpha;QS 1例。1 735例&alpha;地中海贫血中,静止型409例,轻型1 272例(血液学表现为轻度小细胞低色素贫血),Hb H病54例,临床表现为中重度贫血,可伴有肝脾肿大、黄疸等。结论广东省清远地区&alpha;地中海贫血以东南亚杂合子--SEA/&alpha;&alpha;基因型最常见,临床存在较多的轻型&alpha;地贫患者,该地区人群婚配生育Hb H病或重型&alpha;地贫患儿的概率较高。</p> 2020年08月14 02:02 2017年第06期 584 588 621871 <p> 黄利华,刘冬霞,李伟明,李扬秋</p> <p> 65例染色体核型为46,XY的尿道下裂患者AR和SRD5A2基因突变分析</p> /oa/darticle.aspx?type=view&id=201712132 <p> 目的&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp; 观察临床诊断为尿道下裂、染色体核型为46,XY的患者AR及SRD5A2基因突变情况,探讨尿道下裂患者的遗传病因。方法&nbsp;&nbsp;&nbsp; &nbsp;运用Sanger测序技术对2015-2017年在四川省人民医院就诊的65例临床诊断为尿道下裂、染色体核型为46,XY的患者AR和SRD5A2基因编码区进行检测。对检出候选致病突变行家系分析,对新突变行生物信息学分析。结果&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp; 65例尿道下裂患者中,8例患者在AR基因上存在半杂合子突变,共7个突变等位基因,其中2个突变未报道过:c.1792A&gt;C、c.2581A&gt;T。25例患者在SRD5A2基因存在纯合或复合杂合突变,共17个突变等位基因,其中4个突变未报道过:c.269A&gt;C、c.350C&gt;A、c.365A&gt;G、c.662T&gt;G。SRD5A2基因1号和4号外显子为突变热区,c.680G&gt;A、c.16C&gt;T为突变热点。AR和SRD5A2基因突变检出率为51%(33/65)。结论&nbsp;&nbsp;&nbsp; 在染色体核型为46,XY尿道下裂患者中存在AR和SRD5A2基因突变。6个新突变丰富了AR和SRD5A2基因突变谱。</p> 2020年08月14 02:02 2018年第11期 998 1004 948761 <p> 郑小琴,毛宇,邱碧原,彭春艳,马誓,唐向兰,杨季云,杨正林</p>