[1]丁可军,何志旭,舒莉萍,等.pCS2+-FLASH重组质粒的构建及斑马鱼FLASH基因反义mRNA探针的制备[J].第三军医大学学报,2010,32(10):1119-1120.
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pCS2+-FLASH重组质粒的构建及斑马鱼FLASH基因反义mRNA探针的制备(/HTML )
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《第三军医大学学报》[ISSN:1000-5404/CN:51-1095/R]

卷:
32卷
期数:
2010年第10期
页码:
1119-1120
栏目:
技术方法
出版日期:
2010-05-30

文章信息/Info

作者:
丁可军何志旭舒莉萍许威姬牧远杨小燕
贵阳医学院:儿科教研室,组织工程与干细胞中心,免疫教研室;郎溪县人民医院儿科
关键词:
斑马鱼pCS2+FLASH反义mRNA
分类号:
R394-33
文献标志码:
B
摘要:
目的   构建斑马鱼pCS2+-FLASH重组质粒,制备斑马鱼FLASH 反义mRNA探针。   方法   提取斑马鱼胚胎总RNA后经RT-PCR克隆斑马鱼FLASH基因片段,将得到的FLASH片段和pCS2+质粒用BamHⅠ及HindⅢ双酶切后插入pCS2+质粒,通过对重组质粒进行双酶切及插入片段序列测序鉴定后,经T3 RNA体外转录体系合成DIG-FLASH基因反义mRNA探针。   结果   RT-PCR法扩增出长度为533 bp的特异性产物,构建的pCS2+-FLASH重组质粒经酶切鉴定和测序结果与预期相符;用FLASH反义mRNA探针进行斑马鱼全胚胎原位杂交,观察到FLASH在野生型斑马鱼神经系统中存在表达。   结论   成功构建了pCS2+-FLASH重组质粒及FLASH基因反义mRNA探针。

参考文献/References:

丁可军, 何志旭, 舒莉萍, 等. pCS2+-FLASH重组质粒的构建及斑马鱼FLASH基因反义mRNA探针的制备[J].第三军医大学学报,2010,32(10):1119-1120.

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更新日期/Last Update: 2010-05-20