[1]陈敏,王永忠,江培学,等.一种高特异性和灵敏性的HBV cccDNA检测方案研究[J].陆军军医大学学报(原第三军医大学学报),2012,34(20):2127-2129.
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一种高特异性和灵敏性的HBV cccDNA检测方案研究(/HTML )
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陆军军医大学学报(原第三军医大学学报)[ISSN:1000-5404/CN:51-1095/R]

卷:
34卷
期数:
2012年第20期
页码:
2127-2129
栏目:
技术方法
出版日期:
2012-10-30

文章信息/Info

作者:
陈敏王永忠江培学张继明
常州市第三人民医院肝病研究所;复星医学科技发展有限公司;复旦大学附属华山医院感染科
关键词:
乙型肝炎病毒共价闭合环状DNA 病毒单质颗粒肝组织血清
分类号:
R446.9
文献标志码:
B
摘要:
目的      建立一种TaqMan探针的实时PCR检测乙型肝炎病毒共价闭合环状DNA(cccDNA)方案。      方法      根据rcDNA与cccDNA结构差异,在缺口两侧设计引物,应用TaqMan探针分析,加入1种可以去除rcDNA和部分扩增产物的依赖ATP的内切酶(Plasmid-Safe ATP-dependent DNase)。      结果       通过高速离心获得病毒单质颗粒验证了该方案的特异性;通过克隆和酶切得到3.2 kb的环状DNA验证了方案的灵敏性。 乙肝患者血清、肝组织cccDNA占总HBV DNA的比例分别为 0.03%~0.81%、0.4%~28.0%。      结论      成功地建立了以TaqMan探针检测血清和肝组织HBV cccDNA的实时PCR检测方法。

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更新日期/Last Update: 2012-10-18