[1]胡承香,杨清武,吕凤林,等.CD14与TLR4相互作用的实验研究[J].陆军军医大学学报(原第三军医大学学报),2004,26(10):0.[doi:10.16016/j.1000-5404.2004.10.014 ]
　HU Cheng-xiang,YANG Qing wu,LU Feng lin,et al.[J].J Amry Med Univ (J Third Mil Med Univ),2004,26(10):0.[doi:10.16016/j.1000-5404.2004.10.014 ]
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CD14与TLR4相互作用的实验研究(/HTML )
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陆军军医大学学报（原第三军医大学学报）[ISSN:1000-5404/CN:51-1095/R]

卷:
26卷
期数:
2004年第10期
页码:
0
栏目:
默认栏目
出版日期:
2004-05-30

文章信息/Info

作者:
胡承香；杨清武；吕凤林；徐祥；
第三军医大学大坪医院野战外科研究所第一研究室；第三军医大学大坪医院野战外科研究所第一研究室创伤烧伤复合伤国家重点实验室；重庆400042；创伤烧伤复合伤国家重点实验室；重庆400042；
Author(s):
HU Cheng-xiang;  YANG Qing wu;  LU Feng lin;  XU Xiang
State Key Laboratory of Trauma, Burns and Combined Injury, Department 1, Institute of Surgery Research, Daping Hospital, Third Military Medical University, Chongqing 400042, China
关键词:
CD14; TLR4; 酵母双杂交系统; 内毒素; 脓毒症
分类号:
R392.11;R39433;
DOI:
10.16016/j.1000-5404.2004.10.014
摘要:
目的　探讨CD14与TLR4(toll likereceptor 4,TLR4)在介导LPS膜信号转导中的相互作用。方法　通过PCR分别克隆CD14cDNA和TLR4胞外区cDNA ,构建其酵母表达载体 ,将载体共转化酵母细胞行酵母双杂交实验。同时 ,应用Pull down和免疫共沉淀实验在体外及体内进一步鉴定CD14与TLR4的相互作用。结果　PCR扩增获得了CD14cDNA和TLR4胞外区cDNA ,并成功地构建了pGADT7AD CD14和pGBKT7BD TLR4酵母双杂交质粒。酵母双杂交系统检测显示pGADT7AD CD14和pGBKT7BD TLR4质粒均无自主激活报告基因LacZ表达的能力 ,在酵母细胞中CD14和TLR4之间存在相互作用。Pull down结果也显示 ,在体外反应体系中 ,CD14和TLR4间存在相互作用。免疫共沉淀实验结果表明 ,在哺乳动物细胞 (HEK 2 93 )这一体内反应体系中 ,CD14与TLR4间也存在交互作用。结论　在酵母细胞、体外反应体系和哺乳动物细胞 (HEK 2 93 )中 ,CD14与TLR4之间存在物理上的相互作用

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备注/Memo

备注/Memo:
国家重点基础研究发展规划资助项目(“973”项目)(G1999054203);国家自然科学基金资助项目(30170968);全军医学科研“十五”计划青年基金项目(01Q105)~~
更新日期/Last Update: 2004-05-30