2. 637000 南充，川北医学院附属医院: 医学研究中心
2. Medical Research Center, Affiliated Hospital of North Sichuan Medical College, Nanchong, Sichuan Province, 637000, China
口腔癌中90%为鳞状细胞癌(oral squamous cell carcinoma, OSCC)，占所有恶性肿瘤的2%~3%。有数据统计显示2018年口腔鳞癌全球新增病例数大于30万例，在恶性肿瘤中发病率位于第19位，病死率位于第15位[1]。探寻口腔癌发病的高危因素并且加以预防是防治的有效措施。低氧诱导因子-1α(hypoxia inducible factor-1α, HIF-1α)由SEMENZA等[2]发现，它是肿瘤对缺氧直接作出反应的一个关键性因子，在肿瘤生长控制方面起重要作用。近年来，国内外大量研究表明：HIF-1α基因多态性影响肿瘤发生、转移、治疗和预后，有望成为新型肿瘤标志物及治疗靶点。目前，中国台湾[3]和西班牙[4]学者的研究都发现HIF-1α基因G1790A多态性与口腔癌发生呈正相关，中国大陆尚未见同类研究，由于OSCC与种族有关[5]，遗传研究需要在不同种族间进行，而台湾人口具有民族多样性，但该研究没有说明研究样本的种族特异性，所以有必要在中国大陆汉族人群中进行OSCC发病风险因素的研究。
本研究采用tag SNPs方法，探讨HIF-1α基因多态性与口腔鳞癌发病风险相关性，以期为相关的临床治疗提供基础研究依据。
1 资料与方法 1.1 研究对象选取2015年6月1日至2016年12月31日在川北医学院附属医院口腔科就诊的口腔癌患者。病例组84例，纳入标准：①经临床和病理确诊为OSCC的患者；②年龄、性别不限；③汉族人群；④签署研究同意书。对照组137例，纳入标准：①川北医学院附属医院体检中心的健康体检者；②年龄、性别与实验组相匹配；③汉族人群；④签署研究同意书。排除标准(病例组和对照组)：①伴有可能的口腔癌前病变，如白斑、扁平苔藓、红斑、口腔黏膜下纤维性变；②伴有可能的其他肿瘤或肿瘤病史者。本研究经过本医院伦理委员会审批[2021ER(A)048]，同时，研究对象均在知情同意的前提下完成调查。
1.2 流行病学调查采用统一编制的调查表，设计表格，由经过统一培训的调查员进行面对面调查，获得研究对象的生活习惯资料。内容包括：①一般资料，年龄、性别、民族、文化程度、婚姻状况、身高、体质量、居住地等；②吸烟史，是否吸烟、开始吸烟年龄、吸烟类型、日均吸烟量、是否戒烟及戒烟年限等；③饮酒史，是否饮酒、饮酒年限、饮酒类型、饮酒频率、饮酒量、饮酒度数、是否戒酒及戒酒年限等；④饮茶，是否饮茶、饮茶年限、饮茶类型、饮茶量、饮茶的浓度及热度；⑤膳食习惯，饮食口味喜好、食用食物种类及频率、食物烹调方式、腌腊食品摄入量、火锅摄入量等；⑥口腔卫生，刷牙频率、目前牙齿个数、有无假牙、假牙材质、是否定期检查等；⑦既往史，是否患高血压、糖尿病、复发性口腔溃疡、口腔白斑等；⑧肿瘤家族史: 家庭人员状况、一级亲属是否患癌及部位、诊断年龄等。
1.3 主要试剂和仪器主要包括：DNA提取试剂盒、TaqDNA聚合酶引物、PCR引物、限制性内切酶、琼脂糖、DL 2000 DNA Marker(TaKaRa公司，日本)，溴化乙啶(大连宝生物工程有限公司)。离心机(Eppendorf公司，德国)，实时荧光定量PCR扩增仪(ABI公司，美国)，紫外凝胶成像系统(Bio-Rad公司，美国)，电泳仪(北京六一仪器厂)。
1.4 样本采集在获取知情同意后，分别采集病例组和对照组对象EDTA抗凝的外周静脉血2 mL，采用Qiagen QIAamp DNA Blood Mini Kit提取血液基因组DNA，DNA浓度：50 ng/μL，D(260)/D(280)范围在1.7~2.0。
1.5 tagSNPs的选择应用美国国立生物技术信息中心(NCBI)Gene和SNP数据库、国际人类基因组单体型图计划数据库(Hapmap)和haploview 4.1软件，按照以下原则筛选tag SNPs。
分析包括基因调控区在内的核苷酸序列范围内的SNPs，利用连锁不平衡法，设定SNPs较小等位基因频率(MAF)>0.05，LD测量值r2>0.8，选取tagSNPs。
着重错义SNPs(non-synonymous SNPs)，并纳入已经研究的功能SNPs，见表 1。
| tag SNPs | 基因 | 染色体 | MAF |
| rs1951795 | HIF-1α | chr14 | 0.244 |
| rs2301113 | HIF-1α | chr14 | 0.363 |
| rs2057482功能SNP | HIF-1α | chr14 | 0.044 |
| rs966824 | HIF-1α | chr14 | 0.216 |
| rs11549467 (G1790A)功能SNP | HIF-1α | chr14 | 0.062 |
| MAF值来自Hapmap数据库 | |||
1.6 SNPs基因型的检测 1.6.1 DNA样本制备
采集研究对象血液样本，枸橼酸钠抗凝，使用血液基因组DNA提取试剂盒(TIANamp Blood，DP318-02，北京TIANGEN)按说明操作。
1.6.2 基因型分析使用iMLDR进行SNPs基因分型。设计合成PCR反应引物和连接反应探针(表 2、3)，PCR反应条件：1 μL GC-I buffer (TaKaRa公司，日本), 3.0 mmol/L Mg2+, 0.3 mmmol/L dNTP, 1 U HotStar Taq Polymerase (Qiagen公司), 1 μL genomic DNA (5~10 ng/μL), 1 μL Multiplex-PCR primer mix. 95 ℃ 2 min，94 ℃ 20 s，65 ℃ 40 s，72 ℃ 1.5 min，11个循环(每个循环降低0.5 ℃)，然后94 ℃ 20 s, 59 ℃ 30 s, 72 ℃ 1.5 min，72 ℃ 2 min，4 ℃共24次循环。连接PCR反应包括1 μL 10×ligation buffer, 0.25 μL Tag DNA ligase, 0.4 μL 5’ligation primer (1 μmol/L), 0.4 μL 3’ligation primer (2 μmol/L), 2 μL纯化PCR产物，连接PCR反应条件：94 ℃ 1 min，56 ℃ 4 min，共38个循环。选择20%样本测序验证。
| 引物 | 引物序列(5′→3′) | 退火温度/℃ |
| rs11549467F | GCTGAAGACACAGAAGCAAAGAACC | 64.77 |
| rs11549467R | GGCAGTGGTAGTGGTGGCATT | 64.43 |
| rs1951795F | CCATGTCCTTTGTGTCCAGAATCTC | 65.19 |
| rs1951795R | TGTGGCCTAAGCCATCAACGAT | 65.96 |
| rs2057482F | CTGGGGCAATCAATGGATGAAA | 66.14 |
| rs2057482R | TGAGCTGTCTGTGATCCAGCATTA | 64.29 |
| rs2301113F | TTTCTACTCCCACCCCCGACA | 65.99 |
| rs2301113R | TTGGTAATTCACATCCCACAATGG | 64.78 |
| rs966824F | TCCAAGTCTGCAGTCAGGACACC | 66.12 |
| rs966824R | CTCCTTTGCTGCCAGTGAGCTA | 64.16 |
| 探针 | 目标基因 | 探针序列(5′→3′) | 退火温度/℃ |
| rs11549467RG | G | GACTTGCGCTTTCAGGGCTAGC | 69.47 |
| rs11549467RA | A | GACTTGCGCTTTCAGGGCTGGT | 67.06 |
| rs11549467RP | GGAACTGCTTTCTAATGRTGACAACT | 63.04 | |
| rs1951795RC | C | CTGAGTCATGGTTAAGCGTTGAAGAACTG | 67.58 |
| rs1951795RA | A | CTGAGTCATGGTTAAGCGTTGAAGAACTT | 66.38 |
| rs1951795RP | TTTTGAACCACTGAAATAAGTCAACTTAAATT | 63.35 | |
| rs2057482RC | C | TAGATGTAGAAAATATAAATAGACTGCTTTAGGAAG | 60.10 |
| rs2057482RT | T | TAGATGTAGAAAATATAAATAGACTGCTTTAGGGAA | 60.32 |
| rs2057482RP | TGAGCCACCAGTGTCCAAAAA | 63.86 | |
| rs2301113RC | C | CCTTTGAACTGAGAAGGCACACTCATG | 69.15 |
| rs2301113RA | A | CCTTTGAACTGAGAAGGCACACTCGTT | 67.82 |
| rs2301113RP | TGGTGACTGAGCTACCTAAAAATCTCA | 63.52 | |
| rs966824RC | C | GCCTTTTTCAAGAAAATGGTGACG | 68.45 |
| rs966824RT | T | GCCTTTTTCAAGAAAATGGTGACA | 67.16 |
| rs966824RP | P | CAATAACTTCCTTAAATTCTGACTATGGTTTCC | 64.87 |
1.7 统计学分析
使用SPSS 19.0统计软件，计量资料以x±s表示，应用两独立样本t检验，计数资料采用χ2检验，非参数检验采用Wilcoxon-Mann-Whitney秩和检验；采用优势比(OR)及其95%可信区间(95%CI)表示率的相关度；α=0.05为检验水准。比较组间基因型和等位基因的分布及Hardy-Weinberg定律检验采用拟合优度χ2检验；单因素分析、多元Logistic回归分析用以调整各环境因素的影响；用SHEsis软件对基因型进行单倍体型分析。
2 结果 2.1 一般情况口腔癌病例组共84例，年龄(64.74±11.35)岁；对照组共137例，年龄(62.39±12.16)岁。病例组与对照组年龄和性别比较差异均无统计学意义(Z=-1.883, P=0.06;χ2=0.206, P=0.650), 具有可比性。
2.2 哈温平衡检验基因位点基因频率分布符合Hardy-Weinberg平衡定律(P>0.05), 选择的样本具有群体代表性。
2.3 HIF-1α基因多态性与口腔鳞癌发病相关性的分析应用多元Logistic回归分析，校正年龄、性别、吸烟、饮酒、腌腊食品摄入、食用火锅等因素后，对各个多态性位点的显性模型、隐性模型、加性模型、等位基因模型等遗传模型进行分析，发现在隐性和相加遗传模式下，rs966824与口腔鳞癌发病相关(隐性模型，OR=10.464，95%CI：1.117~98.058，P=0.04；加性模型，OR=1.873，95%CI：1.077~3.256，P=0.026)，其余SNP位点与口腔鳞癌发病风险未见明显相关(表 4)；rs1951795位点(加性模型，OR=0.219，95%CI：0.057~0.841，P=0.027；显性模型，OR=0.192，95%CI：0.040~0.924，P=0.039)数据结果显示：与单个基因型位点分析结果相比较，多个基因型位点共同分析时rs1951795基因多态性可能是与口腔鳞癌发病的保护因素(表 5、6)。另外，Logistic回归分析发现年龄和饮酒是口腔鳞癌发病的危险因素(P < 0.05，表 5、6)。
| 多态性位点 | OR(95%CI) | P值 |
| rs966824 | ||
| 加性‘CC’对比‘TT’ | 1.873(1.077~3.256) | 0.026 |
| 显性‘CC’对比‘TT+CT’ | 1.849(0.991~3.452) | 0.053 |
| 隐性‘CC+CT’对比‘TT’ | 10.464(1.117~98.058) | 0.040 |
| 等位 | 1.476(0.907~2.403) | 0.117 |
| rs11549467 | ||
| 加性‘GG’对比‘AA’ | 1.090(0.480~2.477) | 0.836 |
| 显性‘GG’对比‘AA+AG’ | 1.108(0.408~3.009) | 0.841 |
| 隐性‘GG+AG’对比‘AA’ | 1.165(0.101~13.433) | 0.903 |
| 等位 | 1.051(0.445~2.485) | 0.909 |
| rs1951795 | ||
| 加性‘CC’对比‘AA’ | 1.127(0.663~1.914) | 0.659 |
| 显性‘CC’对比‘AA+CA’ | 1.185(0.655~2.145) | 0.574 |
| 隐性‘CC+CA’对比‘AA’ | 0.824(0.134~5.075) | 0.834 |
| 等位 | 1.029(0.647~1.638) | 0.903 |
| rs2057482 | ||
| 加性‘CC’对比‘TT’ | 1.252(0.691~2.269) | 0.459 |
| 显性‘CC’对比‘TT+CT’ | 1.315(0.692~2.500) | 0.404 |
| 隐性‘CC+CT’对比‘TT’ | 0.840(0.066~10.626) | 0.893 |
| 等位 | 1.071(0.627~1.831) | 0.802 |
| rs2301113 | ||
| 加性‘AA’对比‘CC’ | 0.872(0.547~1.389) | 0.563 |
| 显性‘AA’对比‘CC+CA’ | 0.883(0.489~1.596) | 0.681 |
| 隐性‘AA+CA’对比‘CC’ | 0.735(0.254~2.130) | 0.571 |
| 等位 | 0.818(0.543~1.233) | 0.337 |
| 危险因素 | 回归系数 | 回归系数 标准误 |
OR(95%CI) | P值 |
| 性别 | -0.577 | 0.391 | 0.561(0.261~1.208) | 0.140 |
| 年龄 | 0.044 | 0.017 | 1.045(1.010~1.081) | < 0.011 |
| 吸烟 | 0.003 | 0.408 | 1.003(0.451~2.231) | 0.995 |
| 饮酒 | 1.773 | 0.423 | 5.891(2.571~13.497) | < 0.001 |
| 腌腊制品 | 0.438 | 0.380 | 1.550(0.736~3.263) | 0.249 |
| 火锅 | 0.180 | 0.368 | 1.197(0.582~2.463) | 0.625 |
| rs966824 | 1.899 | 0.648 | 6.676(1.874~23.788) | 0.003 |
| rs11549467 | 0.430 | 0.440 | 1.538(0.649~3.640) | 0.328 |
| rs1951795 | -1.520 | 0.687 | 0.219(0.057~0.841) | 0.027 |
| rs2057482 | 0.269 | 0.543 | 1.308(0.451~3.791) | 0.621 |
| rs2301113 | -0.221 | 0.303 | 0.802(0.442~1.453) | 0.466 |
| 危险因素 | 回归系数 | 回归系数 标准误 |
OR(95%CI) | P值 |
| 性别 | -0.567 | 0.387 | 0.567(0.266~1.211) | 0.143 |
| 年龄 | 0.046 | 0.017 | 1.047(1.012~1.083) | 0.008 |
| 吸烟 | -0.061 | 0.408 | 0.940(0.423~2.093) | 0.880 |
| 饮酒 | 1.780 | 0.424 | 5.932(2.585~13.612) | < 0.001 |
| 腌腊食品 | 0.458 | 0.377 | 1.581(0.754~3.312) | 0.225 |
| 火锅 | 0.192 | 0.368 | 1.211(0.589~2.491) | 0.603 |
| rs2057482 | 0.289 | 0.570 | 1.335(0.437~4.078) | 0.612 |
| rs2301113 | -0.246 | 0.374 | 0.782(0.376~1.627) | 0.510 |
| rs11549467 | 0.573 | 0.552 | 1.774(0.601~5.239) | 0.299 |
| rs966824 | 2.029 | 0.772 | 7.603(1.673~34.541) | 0.009 |
| rs1951795 | -1.649 | 0.801 | 0.192(0.040~0.924) | 0.039 |
2.4 基因型和等位基因分布比较
HIF-1α各个受检SNP位点基因型和等位基因在病例组和对照组的分布情况见表 7，各个位点基因型差异无统计学意义。
| 位点 | 组别 | 基因型 | P值 | 等位基因 | P值 | Phwe值 | |||
| WW | WM | MM | W | M | |||||
| rs11549467 | GG | GA | AA | 0.91 | G | A | 0.90 | ||
| 病例组 | 76(90.48) | 7(8.33) | 1(1.19) | 159(94.64) | 9(5.36) | 0.66 | |||
| 对照组 | 125(91.24) | 10(7.30) | 2(1.46) | 260(94.89) | 14(5.11) | 0.69 | |||
| rs1951795 | CC | CA | AA | 0.96 | C | A | 0.90 | ||
| 病例组 | 49(58.33) | 33(39.29) | 2(2.38) | 131(77.98) | 37(22.02) | 0.19 | |||
| 对照组 | 82(59.85) | 51(37.23) | 4(2.92) | 215(78.47) | 59(21.53) | 0.58 | |||
| rs2057482 | CC | CT | TT | 0.89 | C | T | 0.80 | ||
| 病例组 | 59(70.24) | 24(28.57) | 1(1.19) | 142(84.52) | 26(15.48) | 0.40 | |||
| 对照组 | 99(72.26) | 36(26.28) | 2(1.46) | 234(85.40) | 40(14.60) | 0.53 | |||
| rs2301113 | AA | CA | CC | 0.59 | A | C | 0.34 | ||
| 病例组 | 38(45.24) | 40(47.62) | 6(7.14) | 116(69.05) | 52(30.95) | 0.30 | |||
| 对照组 | 53(38.69) | 71(51.82) | 13(9.49) | 177(64.60) | 97(35.40) | 0.12 | |||
| rs966824 | CC | CT | TT | 0.06 | C | T | 0.12 | ||
| 病例组 | 52(61.90) | 27(32.14) | 5(5.95) | 131(77.98) | 37(22.02) | 0.67 | |||
| 对照组 | 94(68.61) | 42(30.66) | 1(0.73) | 230(83.94) | 44(16.06) | 0.11 | |||
| WW: 纯合野生型; WM: 杂合型; MM: 纯合突变型；W：野生型基因；M：突变型基因；Phwe值：哈温平衡检验P值 | |||||||||
3 讨论
OSCC 90%发生于45岁以上，研究表明：口腔鳞癌早期时5年生存率约为82%，而晚期生存率仅为20%[6]，近年来，OSCC的发病率和病死率呈上升趋势。OSCC的形成涉及遗传因素、环境危险因素及其交互作用，它的发生、发展是基因受诱导突变及细胞周期被干扰调控后作用于免疫系统的一个动态协同过程。缺氧是肿瘤生成和生长的重要环境调节剂，HIF-1α是一种氧敏感转录因子，介导200多个靶基因的转录，这些基因在缺氧条件下协调肿瘤的增殖和进展，包括致癌、细胞增殖、DNA突变、侵袭、转移等。HIF-1α在癌细胞中通过肿瘤抑制因子如希佩尔林道肿瘤抑制蛋白(von-Hippel-Lindau tumor suppressor protein, pVHL)或人第10号染色体缺失的磷酸酶及张力蛋白同源基因(phosphatase and tensin homolog deleted on chromosome ten, PTEN)功能的丧失和癌基因功能的增加而被激活，通过上调葡萄糖转运蛋白、葡萄糖摄取和己糖激酶，促进糖酵解，从而促进有氧糖酵解，达到为癌细胞供能的目的[7]。在多种人类癌症，如结肠、乳腺、胃、胰腺、前列腺以及头颈部癌症中，均发现HIF-1α基因过度表达[8]。HIF-1α的高表达可能通过影响癌胚抗原相关细胞黏附分子1(carcinoembryonic antigen-related cell adhesion molecule 1, CEACAM1)和血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor，VEGF)的水平，促进肿瘤组织新血管的生成，从而推进口腔癌的发生、发展[9]。印度学者对过往研究总结得出：HIF-1α表达增加的口腔上皮增生性病变发生恶性转化的风险更高，表明HIF-1α与口腔鳞癌的发生有密切相关性[10]。并且有研究表明在携带多态性杂合子的头颈鳞状细胞癌患者中，HIF-1α表达更显著[11]。
遗传的多态性在很多癌症的研究中被认为起重要作用，HIF-1α基因多态性在癌症作用方面尤其受到关注。国内学者评估了2020年4月之前发表的病例对照研究中HIF-1α所有已鉴定的SNP(rs11549465，rs11549467和rs2057482)与癌症总风险之间的关联，发现rs11549465和rs11549467的变异基因型与总体癌症风险显著增加有关，而rs2057482的变异T等位基因显示总体癌症风险显著降低[12]。HIF-1α基因的功能多态性可以通过增加基因组不稳定性，特别是在腺癌中，大大影响肺癌的发生。XU等[13]研究总结发现HIF-1α基因rs11549465和rs11549467与亚洲人肺癌易感性存在一定关联。国内WANG等[14]通过病例对照研究证明HIF-1α SNP rs2057482是胰腺癌的发病风险和不良预后的重要遗传变异，这为口腔癌的遗传研究提供了思路。HIF-1α基因多态性可能是OSCC的易感因素。已有研究证明：在口腔鳞癌发生、发展过程中，IL-8(rs4073)、MMP-1(rs2071230、rs470558)和MMP-13(rs2252070)与环境因素的联合作用是一种危险因素[15]。临床有研究表明：HIF-1α在正常口腔黏膜中几乎不表达，在口腔鳞状细胞癌中表达明显增强，口腔鳞癌中HIF-1α表达与年龄和性别及肿瘤的大小无相关关系，但与肿瘤的病理分级、临床分期及淋巴结的转移呈显著正相关关系[16]，提示HIF-1α的过度表达在口腔鳞癌的发生、发展及预后过程中发挥了重要作用。
本研究结果表明：HIF-1α中rs966824基因型与口腔鳞癌的发生有一定的相关性，说明rs966824基因多态性在口腔鳞癌的进展中是危险因素。在国内已发表的文献中，有研究RBTF报告rs966824与急性高原病[17]及慢性阻塞性肺疾病[18]遗传易感性之间的关系，结果显示都无明显的关联性，目前HIF-1α rs966824基因多态性与口腔癌之间关系尚不清楚。本研究虽然样本量有限，然而根据统计学校正结果，我们有理由相信rs966824基因多态性与口腔鳞癌的发展有着密切联系。
本研究结果显示：单个位点条件下分析rs1951795基因多态性与口腔癌的发生在统计学上无明显相关性，然而在年龄、饮酒等生活因素及其他基因位点的多因素共同作用下，rs1951795基因多态性与口腔鳞癌的发生产生了相关性，其可能是与口腔鳞癌发病相关的保护因素。由于口腔癌的发生、发展并不是由单个危险因素引起的，CHEN等[19]认为基因与基因间和基因与环境间的交互作用会促进口腔癌的发生、发展，所以该结果可能是遗传因素等交互作用导致的变化。波兰学者发现HIF-1α中rs1951795对类风湿因子及红细胞沉降率有一定的影响，认为rs1951795基因多态性与类风湿关节炎的进展有一定的关联性[20]。后续可以进一步探究rs1951795多态性在交互作用下成为保护因素的条件。
rs966824、rs1951795位点与HIF-1α高表达其间关系及常氧条件下SNP位点促进HIF-1α激活的具体机制尚未探明，但FU等[21]的研究结果证实：C1772T和G1790A两位点的突变基因型与野生型比较，常氧和低氧条件下突变基因型均能显著提高HIF-1α对下游基因的转录激活能力，HIF-1α蛋白的表达量亦增多。西班牙学者MUÑOZ-GUERRA等[4]进一步研究发现HIF-1α C1773T、G1790A位点多态性导致P582S和A588T氨基酸发生变化，这些受影响的氨基酸位于氧依赖降解域内，非常接近脯氨酸564(P564)和脯氨酸402(P402)，从而增加HIF-1α蛋白的稳定性，并影响HIF-1α基因的表达，而增强HIF-1α基因的转录活性，推断rs966824、rs1951795多态性与HIF-1α高表达可能关联，未来或许可以进一步探究两个位点致氨基酸的改变与HIF-1α表达的关系。
另外，本研究还发现川东北地区人群口腔鳞癌易感性与该地区较特色的生活习惯，包括经常食用腌腊食品和火锅等并无明显的统计学相关性，说明腌腊食品和火锅可能对口腔鳞癌的易感无明显影响；年龄和饮酒两个因素与口腔鳞癌发生有明显联系，均是口腔鳞癌发生的高危因素，这符合大多数现有研究的结论，有助于指导临床上口腔癌的早期预防。
本研究虽然主要分析了HIF-1α多个基因型、等位基因与口腔鳞癌发生、发展的关系，明确了口腔鳞癌与HIF-1α基因位点多态性的关联性，然而本研究结果并未发现G1790A SNP与口腔癌易感有明显的相关性，这与中国台湾[3]和西班牙[4]的研究结果不同，可能是由于实验样本量选择相对较少，使用探索性方法进行检验，未来需要开展更多病例对照研究来得出更真实可靠的结论。对于以后的相关研究，基因和基因以及基因和环境的相互作用也应成为重点研究方向，需要针对HIF-1α rs966824及rs1951795基因位点进一步扩大样本才能验证它们在口腔鳞癌中的作用，探究rs966824是否能够作为早期预防口腔鳞癌发生的标志物，完善对HIF-1α基因多态性在口腔鳞癌易感性方面的认识，为口腔癌症领域的精准医疗和个性化预防提供一定的理论和临床依据。
综上所述，口腔鳞状细胞癌中HIF-1α基因多态性与口腔癌的发生可能有相关性，检测其多态性对癌症的早期发现和预防有一定意义。
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