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二十二碳六烯酸诱导细胞自噬减轻缺血性脑卒中神经损伤
孙而艺1, 张旋2, 杨阳2, 刘伟2, 向欣1, 冯华2, 杨华1     
1. 550025 贵阳,贵州医科大学;
2. 400038 重庆,第三军医大学西南医院神经外科
[摘要] 目的 探讨二十二碳六烯酸(docosahexaenoic acid,DHA)对大鼠缺血性脑卒中神经损伤的保护作用及其机制。方法 利用60只280~330 g成年SD雄性大鼠建立永久性局灶脑梗死模型(permanent middle cerebral artery occlusion,pMCAO),按随机数字表法分为3组(n=20):假手术组、模型载体空白组(pMCAO+Veh)和模型DHA给药组(pMCAO+DHA)。建模成功后,按预设时间点对动物体质量、生存时间、神经功能、脑梗体积等大体指标进行评测;利用HE、Nissl染色对脑组织形态学改变进行观察;Western blot检测神经细胞自噬相关蛋白变化规律。结果 造模后24、72 h,pMCAO+Veh组动物体质量及生存率较假手术组出现明显下降(P<0.05),DHA给药可明显改善上述指标,但差异无统计学意义(P>0.05);pMCAO+Veh组第7天生存率仅为38%,DHA早期干预可使第7天生存率提高至52%,但2组差异无统计学意义(P>0.05),DHA可明显改善由疾病模型造成的神经功能,包括认知、感觉、运动功能,从而获得更高的神经功能分数及更少的平衡木错失(P<0.05)。建模72 h后TTC染色发现,pMCAO+DHA组较pMCAO+Veh组可减少约17%的梗死体积(P<0.05);HE及Nissl染色发现,DHA给药可显著减轻皮层梗死区神经细胞的病理性损伤;Western blot蛋白检测,DHA可显著抑制梗死后mTOR表达(P<0.01),同时增强LC3Ⅰ/Ⅱ表达(P<0.05)。结论 DHA可显著减轻由缺血性脑卒中引起的病理性改变,其保护机制可能为负性调控mTOR通路作用从而激活自噬。
[关键词] 二十二碳六烯酸     缺血性脑卒中     自噬     神经功能保护    
Docosahexaenoic acid alleviates neural injuries following permanent focal cerebral ischemia by inducing autophagy in rats
SUN Eryi1 , ZHANG Xuan2 , YANG Yang2 , LIU Wei2 , XIANG Xin1 , FENG Hua2 , YANG Hua1     
1. Department of Neurosurgery, Affiliated Hospital of Guizhou Medical University, Guizhou Province, Guiyang, 550025;
2. Department of Neurosurgery, Southwest Hospital, Third Military Medical University, Chongqing, 400038, China
Support by the National Key Basic Research Development Program "973" plan (2014CB541600)
Corresponding author: YANG Hua, E-mail: yhmed@163.com
[Abstract] Objective To evaluate the neuroprotective effect of docosahexaenoic acid (DHA) in rats with permanent focal cerebral ischemia and explore the possible mechanisms. Methods Sixty male SD rats were randomly divided into 3 groups (n=20), namely the sham-operated group, permanent middle cerebral artery occlusion(pMCAO) with vehicle treatment group(pMCAO+Veh), and pMCAO with DHA treatment group(pMCAO+DHA). In the latter two groups, the rats received intraperitoneal injections of saline and DHA 3 h after pMCAO, respectively. The body weight, survival rate, neurological function score and cerebral ischemia volume of the rats were measured at different time points after the operation. HE and Nissl staining were used to examine the pathological changes in the brain tissues, and the expressions of autophagy-related proteins were detected with Western blotting. Results At 24 and 72 h after the operation, the rats in pMCAO+Veh group showed significantly reduced body weight and lower survival rate as compared with the sham-operated rats(P < 0.05); treatment with DHA improved the body weight and promoted survival of the rats following pMCAO, but these effects were not statically significant (P > 0.05). In pMCAO+Veh group, the survival rate of the rats was 38% on day 7, as compared with 52% in DHA treatment group (P > 0.05).DHA obviously improved the cognitive, sensory and motor function deficits of the rats at 24 and 72 h after pMCAO, significantly increased the neurological scores of the rats and improved their performance in balance beamtest (P < 0.05). At 72 h after the operation, the results of TTC staining showed that DHA treatment significantly reduced the cerebral infarction volume by 17% as compared with saline treatment(P < 0.05). HE and Nissl staining showed alleviated pathologies in the neural cells in the ischemic cerebral cortex in DHA-treated rats. As shown by Western blotting, DHA treatment obviously suppressed the expression of mTOR protein following pMCAO(P < 0.01) and promoted the expression of LC3Ⅰ/Ⅱ protein in the brain tissue (P < 0.05). Conclusion DHA can significantly alleviate pathologies in the brain tissue of rats following focal cerebral ischemia, possibly by negative regulation of the mTOR pathway to activate the mechanism of autophagy.
[Key words] docosahexaenoic acid     ischemic stroke     autophagy     neuroprotection    

缺血性脑卒中是目前全世界共同面对的健康威胁,每年患者的致死致残数量高居各类疾病的第二位[1],但因其发病具有隐匿和急骤的特点,使其治疗的时效性一直是困扰临床的难题。二十二碳六烯酸(docosahexaenoic acid,DHA)是一类富集于鱼肝油及海藻的人体必需的多不饱和脂肪酸,近年研究发现其具有促进神经发育、减轻神经退行性损害、延缓大脑衰老[2]、促进和维持记忆[3-4]的作用。在脑卒中领域,也有研究表明早期应用DHA可发挥神经保护效应[5-8],但机制尚不清楚。自噬在正常情况下是机体清除衰老细胞器、循环利用营养物质的一种生理过程[9]。近年研究发现自噬广泛参与脑卒中的发生发展过程,具有分解受损细胞器为细胞紧急供能促进细胞存活的积极作用[10]。DHA是膜磷脂的重要构成成分[11],而磷脂类可以作为细胞自噬小体的成分及信号平台[12]。因此,DHA可否通过促进自噬来减轻缺血性脑卒中病理性损伤值得探讨。本研究拟通过建立永久性局灶性脑梗死大鼠模型模拟临床缺血性脑卒中疾病状态,观察DHA早期干预对缺血性脑卒中病理损伤的改善作用,初步探讨其潜在作用机制,以期为临床治疗缺血性脑卒中提供新的治疗策略。

1 材料与方法 1.1 实验动物

健康成年SD大鼠60只(第三军医大学实验动物中心提供),体质量280~330 g,人工光照循环,允许自由摄食饮水。所有动物实验原则和操作遵循尽量减轻动物痛苦原则,经由重庆市第三军医大学实验动物保障和使用委员会审批。

1.2 分组及药物治疗

按随机数字表法将实验大鼠分成3组(n=20):假手术组、模型载体空白组(pMCAO+Veh组)和模型DHA(美国Sigma公司)给药组(pMCAO+DHA组)。假手术组仅分离相关血管,然后缝皮结束;pMCAO+Veh组行pMCAO术后3 h予以生理盐水(5 mL/kg)腹腔注射;pMCAO+DHA组行pMCAO术后3 h予以DHA(35 mg/kg)腹腔注射。

1.3 永久性局灶性脑梗死模型建立

大鼠给予2%戊巴比妥钠(45 mg/kg)腹腔注射麻醉,仰卧固定。颈前正中切口,暴露游离右侧颈总动脉(right common carotid artery,rCCA)、右侧颈内动脉(rightinternal carotid artery,rICA)及右侧颈外动脉(rightexternal carotid artery,rECA),并于颈内颈外动脉分叉处挂线备用,烧断rECA远端,结扎rCCA,用微型动脉夹夹闭rICA远心端后,迅速于rECA残端近心端剪一小口,从切口处插入一端光滑球形尼龙线[直径为0.28 mm,球直径为(0.38±0.02) mm,距球端19~20 mm处预留标记(购自北京西浓公司)。线栓插入rICA后,于入口处轻轻系紧预留缝线防止血液反流,松开夹闭rICA的动脉夹,继续插入尼龙线至稍有阻力后略回撤,至线插入深度为(18.5±0.5) mm左右;将预留线结扎,逐层缝合皮肤,将露出皮肤线栓尾端剪去,37 ℃恒温复苏室复苏。入组标准:动物麻醉苏醒后出现对侧前肢卷曲、行走转圈、对侧倾倒症状者。

1.4 神经功能评估及行为学测试

建模后24、72 h利用改良Garcia评分量表对各组动物双盲评分,评分内容包括:① 自主活动的程度;② 向左环行或倾倒;③ 提尾时左前肢伸不直;④ 攀爬能力;⑤ 对内耳道触碰是否摇头;⑥ 触须反应。每项观察指标无异常计0分,轻度异常计1分,中度异常计2分,严重异常计3分,6项指标合计为神经功能得分。选用平衡杆(Beam-Walking)检测造模后大鼠的运动功能,平衡木长240 cm、宽1.8 cm、高60 cm。造模前1 d大鼠进行平衡木训练,保证初始状态的大鼠同质性。实验时在平衡木终点处放置大鼠熟悉的鼠笼,大鼠会本能地从起点走向终点。观察大鼠脑梗对侧前后肢体在50步以内的错步次数并用以统计。

1.5 脑梗体积测算

建模后24、72 h,动物麻醉后断头取脑,新鲜的脑组织放置于-80 ℃度冰箱30 min。从前向后冠状位切片,片厚2 mm,按前后顺序放置入24孔板中,加入2,3,5-氯化三苯基四氮唑染液(TTC,购自南京建成公司),水浴箱37 ℃避光孵育20 min,翻面孵育20 min,PBS漂洗后4%多聚甲醛固定30 min。照片后利用Image-J计算各脑片缺血性病理损伤面积。参照梗死体积计算公式(进行脑水肿校正):{[总缺血性病损部位-(同侧半球体积-对侧半球体积)]/对侧半球体积}×100%。

1.6 HE及Nissl染色

建模后72 h,大鼠麻醉后给予心脏依次灌注生理盐水、4%多聚甲醛各200 mL。剥离脑组织予多聚甲醛后固定,酒精脱水后整体石蜡包埋。冠状位,从前囟后约1.2 mm处连续切片(4 μm),选取前囟后约1.34 mm处脑片。经过常规二甲苯脱蜡、梯度酒精水化后行HE、Nissl染色。染色结束后,蒸馏水洗净染料,分别置于70%、80%、95%以及100%乙醇中脱水,再用二甲苯透明。最后用中性树胶封片,显微镜观察后拍照。

1.7 Western blot检测

按预设时间点收集各组动物缺血半暗带区新鲜皮层脑组织标本,经组织匀浆器破碎,4 ℃裂解,离心,提取上清液,使用BCA蛋白浓度测定试剂盒测定蛋白浓度,再加入加样缓冲液配平后置沸水中煮15 min,室温冷却后分装,放于-80 ℃冰箱冻存备用;制备4%浓缩胶及12%分离胶进行电泳。电泳结束后,0.2 μm PVDF膜(购自美国Milipore公司)转膜,5%脱脂牛奶室温封闭2 h后分别给予LC3Ⅰ/Ⅱ(1:5 000稀释)、mTOR(1:5 000稀释)及β-actin(1:5 000稀释)(购自美国CST公司),4 ℃摇床孵育过夜。漂洗后二抗室温孵育2 h,Bio-Image系统曝光显影摄片,采用Image J软件对图片进行灰度值分析。

1.8 统计学处理

采用SPSS 18.0统计软件,数据以x±s表示,两两对比使用t检验;多组间比较行单因素方差分析。使用log-rank(mantel-cox) test分析生存率。检验水准α=0.05。

2 结果 2.1 DHA早期干预对缺血性脑卒中后大鼠体质量及生存率的影响

造模前后对大鼠进行体质量测量,发现大鼠体质量在造模后24、72 h显著减轻(P<0.05),DHA可一定程度改善pMCAO大鼠24、72 h的体质量减轻,但差异无统计学意义(P>0.05,图 1A)。记录造模后7 d内大鼠死亡情况,并用生存曲线展示(图 1B),pMCAO+Veh组生存率较假手术明显降低(P<0.05),第7天生存率仅为38%,DHA早期干预可使第7天生存率提高至52%,但与pMCAO+Veh组比较差异无统计学意义(P>0.05)。

a:P<0.05,与假手术组比较 A:体质量(n=7);B:生存率(n=10) 图 1 DHA早期干预对缺血性脑卒中后大鼠体质量及生存率的影响

2.2 DHA早期干预缺血性脑卒中后对大鼠神经功能及行为学的影响

利用改良Garcia评分量表评价造模后大鼠神经功能,结果显示:pMCAO+Veh组在造模后24、72 h的神经功能评分较假手术组显著下降(P<0.01),pMCAO+DHA组较pMCAO+Veh组,神经功能明显提高(P<0.05,图 2A)。动物在狭窄的平衡木上行走,可特异性检测动物的运动及平衡能力,利用平衡木实验观察DHA可否改善脑梗后行为学。实验结果显示:pMCAO+Veh组在造模后24、72 h平衡木错步数比例显著高于假手术组(P<0.01),而DHA干预可显著降低脑梗后平衡木错步数比例(P<0.05,图 2B)。

a:P<0.01,与假手术组比较;b:P<0.05,与模型载体空白组比较
A:神经功能;B:精细运动能力
图 2 DHA干预缺血性脑卒中后对大鼠神经功能及运动功能的影响(n=10,x±s)

2.3 DHA干预大鼠缺血性脑卒中对脑梗体积的影响

TTC是脂溶性光敏感复合物,与正常组织中的脱氢酶反应而呈红色,而缺血组织呈苍白。分别将脑梗后24、72 h大鼠脑组织标本进行TTC染色(图 3),发现pMCAO+Veh组脑梗体积显著增加,而且72 h脑梗体积大于24 h脑梗体积(P<0.05),DHA干预后可显著减少24 h及72 h脑梗体积(P<0.05)。

图 3 TTC染色观察DHA干预缺血性脑卒中后对大鼠脑梗体积的影响(从上到下分别为大脑从前到后)

2.4 DHA干预缺血性脑卒中对大鼠脑皮层组织大体情况的影响

pMCAO造模72 h后对各组动物脑皮层石蜡切片进行HE及Nissl染色。结果均显示,pMCAO+Veh组脑梗区域神经细胞数量减小,排列紊乱疏松,部分细胞细胞核固缩深染,胞体缩小变形;pMCAO+DHA组可改善上述病理学改变(图 4)。

图 4 HE及Nissl染色显示DHA干预缺血性脑卒中对大鼠脑皮层病理影响(左下角为指定区域10倍放大图)

2.5 DHA干预缺血性脑卒中大鼠对脑皮层组织非选择性自噬相关蛋白表达的影响

利用Western blot技术检测脑梗后自噬关键基因表达情况和DHA的作用机制。提取“缺血半暗带”区域皮层脑组织总蛋白,Western blot检测显示DHA可提高pMCAO后损伤皮层组织的LC3Ⅰ/Ⅱ表达,提示DHA促进自噬激活(P<0.05,图 5ABC),减少自噬通路内mTOR的蛋白表达(P<0.01,图 5DE)。

a:P<0.05,b:P<0.01,与假手术组比较;c: P<0.05,与模型载体空白组比较
A~C:分别为Western blot检测脑梗24 h及72 h后大鼠皮层脑组织LC3Ⅰ/Ⅱ蛋白表达及其半定量分析,A图中1、2为假手术组,3为模型72 h DAH给药组,4为模型72 h载体空白组,5为模型24 h DHA给药组,6为模型24 h载体空白组;D、E:分别为Western blot检测脑梗72 h后大鼠皮层脑组织mTOR蛋白表达及其半定量分析,D图中1、2为假手术组,3~5为模型72 h DHA给药组,6~8为模型72 h载体空白组
图 5 Western blot检测DHA干预缺血性脑卒中大鼠后脑皮层组织自噬相关蛋白的表达变化(n=3,x±s)

3 讨论

缺血性脑卒中作为心脑血管疾病的常见伴发疾病,其发病率逐年攀高,由于其高复发率和高致死致残率,一直是神经科学领域的研究重点和难点。仅占全身体质量2%的大脑却占用了20%的血供及25%的氧耗,因此脑组织对缺血缺氧极为敏感,一旦发生完全性梗死,神经元细胞将在5 min内发生不可逆的死亡[13]。既往研究表明在影像学上,梗死动脉供血脑区周边会出现一个“缺血半暗带”,在脑卒中早期仅出现代谢功能异常,如果能在早期对其提供一定的养分,提高这部分区域对缺血缺氧耐受能力并及早恢复其正常血供,则该区神经细胞具有恢复正常功能的可能[14],这也是现在缺血性脑卒中的研究热点。DHA作为神经细胞胞膜脂质双层膜结构的重要构成成分,已被发现在包括脑梗死在内的多种神经疾病中发挥抗炎、抗凋亡和保持病理损伤细胞完整性等保护效应,说明其具有广阔的神经保护应用前景[3, 6, 15];但是其具体应用及机制仍待进一步研究。

本研究通过在大鼠中制作永久型大脑中动脉栓塞模型模仿缺血性脑卒中。实验提示,DHA对脑组织缺血后的死亡率及体质量减轻无明显改善作用;但是DHA干预对脑缺血后动物的运动及认知障碍的改善明显。通过对大脑缺血皮层的大体染色结果进行对比,我们发现DHA的干预在组织层面减少了脑梗死的体积即减少了病理性损伤的范围,减少了“缺血半暗带”区域的神经细胞的病理演变进程;在细胞层面改善了由于缺血后脑组织的大量神经细胞的坏死;以上形态学结果进一步证明了我们的神经功能及行为学结果。

自噬是一种在进化上高度保守、通过溶酶体降解细胞器和大分子的生理学过程,是保持细胞稳态的重要过程,阻止有毒代谢和细胞器损伤、吞噬病原体,进而利用吞噬物进行能量和营养物质的循环利用[16]。在某些养分供给不足的情况下,细胞可以通过自噬一方面清除由于营养缺乏导致损伤的细胞器,另一方面可以利用降解受损细胞器得到的物质和能量增强细胞自身的耐受能力,这对神经细胞而言无疑是在缺血缺氧的梗死情况下的一种“最优选择”[17]。在脑梗中,神经细胞缺血缺氧会引发自噬激活,而自噬可以帮助大脑短暂克服因为缺血而造成的能量短缺。近年许多学者认为自噬是缺血性脑卒中的潜在治疗靶点,在缺血期间加强自噬可能起到延长治疗时间窗的作用[18];而本实验也发现,在梗死灶周围的脑组织中代表自噬水平“金标准”的LC3 Ⅰ/Ⅱ蛋白表达水平轻度提高,而DHA不仅可增强自噬上调的程度,而且提前激活了自噬。上述结果说明:① 神经细胞能够通过采取激活自噬的方式对梗死性病理损害进行“自我保护”;② DHA可以增强自噬水平进而发挥神经保护效应;③ DHA可以提前激活自噬达到延长治疗时间窗的作用。

mTOR是自噬在缺血后的主要调控原件[19-20]。在缺血诱导的自噬中,自噬体的形成是由自噬相关基因Atg8(轻链LC3) 和mTOR信号通路介导的;mTOR是氨基酸和ATP的感受器,在自噬过程中发挥门控作用,其活性是自噬体形成、成熟的关键。Atg13是自噬基因编码的蛋白质之一,mTOR磷酸化Atg13,使其不能与Atg1结合形成自噬体[16]。总的来说,mTOR在脑缺血后的表达增加,抑制其表达可以促进自噬发生从而保护脑组织[20]。本实验数据证实DHA抑制了mTOR蛋白的表达,同时自噬形成的轻链蛋白LC3表达增加。提示DHA的干预增强了缺血后自噬表达,从而达到神经存活、减少脑损伤的功能。

综上所述,缺血性脑卒中后DHA的早期应用可以通过调控自噬相关蛋白mTOR及LC3Ⅰ/Ⅱ的表达激活细胞自噬,从而发挥改善缺血性卒中模型动物的一般情况,减轻“缺血半暗带区”神经细胞病理损伤等作用。

参考文献
[1] MOZAFFARIAN D, BENJAMIN E J, GO A S, et al. Executive Summary: Heart Disease and Stroke Statistics-2016 Update: A Report From the American Heart Association[J]. Circulation, 2016, 133(4): 447–454. DOI:10.1161/CIR.0000000000000366
[2] JANSSEN C I, KILIAAN A J. Long-chain polyunsaturated fatty acids (LCPUFA) from genesis to senescence: the influence of LCPUFA on neural development, aging, and neurodegeneration[J]. Prog Lipid Res, 2014, 53: 1–17. DOI:10.1016/j.plipres.2013.10.002
[3] HASHIMOTO M, HOSSAIN S, AI M A, et al. Docosahexaenoic acid: one molecule diverse functions[J]. Crit Rev Biotechnol, 2016: 1–19. DOI:10.1080/07388551.2016.1207153
[4] GOULD J F, TREYVAUD K, YELLAND L N, et al. Does n-3 LCPUFA supplementation during pregnancy increase the IQ of children at school age? Follow-up of a randomised controlled trial[J]. BMJ Open, 2016, 6(5): e011465. DOI:10.1136/bmjopen-2016-011465
[5] KIECOLT-GLASER J K, EPEL E S, BELURY M A, et al. Omega-3 fatty acids, oxidative stress, and leukocyte telomere length: A randomized controlled trial[J]. Brain Behav Immun, 2013, 28: 16–24. DOI:10.1016/j.bbi.2012.09.004
[6] CHANG C Y, KUAN Y H, LI J R, et al. Docosahexaenoic acid reduces cellular inflammatory response following permanent focal cerebral ischemia in rats[J]. J Nutr Biochem, 2013, 24(12): 2127–2137. DOI:10.1016/j.jnutbio.2013.08.004
[7] ARTEAGA O, REVUELTA M, URIGüEN L, et al. Docosahexaenoic Acid Reduces Cerebral Damage and Ameliorates Long-Term Cognitive Impairments Caused by Neonatal Hypoxia-Ischemia in Rats[J]. Mol Neurobiol, 2016. DOI:10.1007/s12035-016-0221-8
[8] LIAO C H, WU Y N, CHEN B H, et al. Neuroprotective effect of docosahexaenoic acid nanoemulsion on erectile function in a rat model of bilateral cavernous nerve injury[J]. Sci Rep, 2016, 6: 33040. DOI:10.1038/srep33040
[9] NAH J, YUAN J, JUNG Y K. Autophagy in neurodegenerative diseases: from mechanism to therapeutic approach[J]. Mol Cells, 2015, 38(5): 381–389. DOI:10.14348/molcells.2015.0034
[10] GINET V, SPIEHLMANN A, RUMMEL C, et al. Involvement of autophagy in hypoxic-excitotoxic neuronal death[J]. Autophagy, 2014, 10(5): 846–860. DOI:10.4161/auto.28264
[11] BAZAN N G. Synaptic lipid signaling: significance of polyunsaturated fatty acids and platelet-activating factor[J]. J Lipid Res, 2003, 44(12): 2221–2233. DOI:10.1194/jlr.R300013-JLR200
[12] SHATZ O, HOLLAND P, ELAZAR Z, SIMONSEN A. Complex Relations Between Phospholipids, Autophagy, and Neutral Lipids[J]. Trends Biochem Sci, 2016, 41(11): 907–923. DOI:10.1016/j.tibs.2016.08.001
[13] DAMODARAN T, HASSAN Z, NAVARATNAM V, et al. Time course of motor and cognitive functions after chronic cerebral ischemia in rats[J]. Behav Brain Res, 2014, 275: 252–258. DOI:10.1016/j.bbr.2014.09.014
[14] LO E H. A new penumbra: transitioning from injury into repair after stroke[J]. Nat Med, 2008, 14(5): 497–500. DOI:10.1038/nm1735
[15] LALANCETTE-HéBERT M, JULIEN C, Cordeau P, et al. Accumulation of dietary docosahexaenoic acid in the brain attenuates acute immune response and development of postischemic neuronal damage[J]. Stroke, 2011, 42(10): 2903–2909. DOI:10.1161/STROKEAHA.111.620856
[16] FU L, HUANG L, CAO C, et al. Inhibition of AMP-activated protein kinase alleviates focal cerebral ischemia injury in mice: Interference with mTOR and autophagy[J]. Brain Res, 2016, 1650: 103–111. DOI:10.1016/j.brainres.2016.08.035
[17] FENG J, CHEN X, SHEN J. Reactive nitrogen species as therapeutic targets for autophagy: implication for ischemic stroke[J]. Expert Opin Ther Targets, 2017, 21(3): 305–317. DOI:10.1080/14728222.2017.1281250
[18] LEVINE B, PACKER M, CODOGNO P. Development of autophagy inducers in clinical medicine[J]. J Clin Invest, 2015, 125(1): 14–24. DOI:10.1172/JCI73938
[19] XING S, ZHANG Y, LI J, et al. Beclin 1 knockdown inhibits autophagic activation and prevents the secondary neurodegenerative damage in the ipsilateral thalamus following focal cerebral infarction[J]. Autophagy, 2012, 8(1): 63–76. DOI:10.4161/auto.8.1.18217
[20] WU Z Q, CUI S Y, ZHU L, et al. Study on the Mechanism of mTOR-Mediated Autophagy during Electroacupuncture Pretreatment against Cerebral Ischemic Injury[J]. Evid Based Complement Alternat Med, 2016: 9121597. DOI:10.1155/2016/9121597
http://dx.doi.org/10.16016/j.1000-5404.201611242
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孙而艺, 张旋, 杨阳, 刘伟, 向欣, 冯华, 杨华.
SUN Eryi, ZHANG Xuan, YANG Yang, LIU Wei, XIANG Xin, FENG Hua, YANG Hua.
二十二碳六烯酸诱导细胞自噬减轻缺血性脑卒中神经损伤
Docosahexaenoic acid alleviates neural injuries following permanent focal cerebral ischemia by inducing autophagy in rats
第三军医大学学报, 2017, 39(14): 1452-1457
Journal of Third Military Medical University, 2017, 39(14): 1452-1457
http://dx.doi.org/10.16016/j.1000-5404.201611242

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收稿: 2016-12-15
修回: 2017-02-06

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