自身抗体是机体B淋巴细胞成熟分化为浆细胞后产生的针对自身成分的抗体总称，HBV患者体内出现高滴度自身抗体, 可能是病毒感染过程中的自身免疫反应所导致，也有可能同时合并有自身免疫性肝病，确切机制有待于进一步研究^[1]。本试验通过对乙型病毒性肝炎(HBV)、自身免疫性肝炎(AIH)患者体内的自身抗体进行检测，并与健康对照组进行比较分析，探讨自身抗体在乙型病毒性肝炎和自身免疫性肝炎中的特点。

1 资料与方法 1.1 一般资料

回顾性从我科样本库调取2014年1月至2015年5月在西南医院感染科门诊就诊的肝病患者血清样本，符合入组病例541份进行自身抗体检测，根据临床诊断分为2组：(1)乙型病毒性肝炎组(HBV)306例，男性180例、女性126例，年龄(45.27±13.36)岁。病毒性肝炎诊断符合2008年病毒性肝炎防治方案^[2]。排除标准:半年内使用干扰素等抗病毒治疗, 合并戊型肝炎病毒(HEV)、丙型肝炎病毒(HCV)、HIV等其他病毒感染; 合并自身免疫性疾病，如系统性红斑狼疮、系统性硬化病、类风湿关节炎。(2)自身免疫性肝炎组(AIH)235例，男性44例、女性191例，年龄(49.74±12.15)岁。AIH诊断符合2002年美国肝病协会发布的诊疗指南^[3]。排除标准:排除现症病毒性肝炎、酒精性肝病、脂肪肝、药物性、血管因素、铜铁代谢异常等遗传性肝病。另选取150例在本院进行健康体检人群作为对照组，男性60例、女性90例，年龄(42.5±14.4)岁。肝炎病毒标志物阴性, 肝功正常, 排除其他自身免疫性疾病。

1.2 检测方法

1.2.1 ANA测定

采用间接免疫荧光法测定，测血清用稀释液1/10、1/100、1/1000、1/3200倍比稀释，应用荧光显微镜观察结果，细胞或组织内出现特异性荧光。血清稀释度≥1∶100判为阳性。所用试剂购自德国欧蒙公司。

1.2.2 欧蒙印迹法

应用德国欧蒙医学诊断有限公司(EUROIMMUN AG, Lubeck, Germany)提供试剂盒，检测项目包括抗可溶性肝抗原/肝胰抗原(SLA/LP)抗体、抗肝肾微粒体Ⅰ型(LKM-1)抗体、抗肝细胞浆抗体Ⅰ型(LC-1)、抗线粒体抗体Ⅱ型(AMA-M2)等，操作方法和结果判定按试剂盒说明书进行。

1.2.3 病毒性肝炎标志物检测

采用化学发光检测血清HBV标志物(HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb、HBcAb)，试剂盒美国雅培公司。严格按说明书操作。

1.2.4 生化指标检测

采用日立HH7600-020全自动生化分析仪及美康试剂对血液标本的ALT、AST和ALP进行检测。采用贝克曼特种蛋白仪检测免疫球蛋白IgG、IgM检测。

1.3 统计学方法

应用SPSS 18.0软件进行统计学分析，样本间比较采用t检验。

2 结果 2.1 ANA检测结果

ANA抗体在HBV组和AIH组中的阳性率分别为9.1%、80.42%，明显高于健康对照组(2.0%，P < 0.05)。AIH组ANA滴度1∶100、1∶320、1∶1000阳性率分别为22.98%、41.28%、14.47%，以高滴度为主(≥1∶320，表 1)。HBV组ANA阳性率较低，并且以低滴度为主(1∶100)，如表 1所示，1∶100、1∶320、1∶1000滴度阳性率分别为6.2%、2.6%、0.3%。

2.2 AMA、ASMA、抗LKM-1及抗SLA/LP抗体检测结果

如表 2所示，AMA在HBV组、AIH组、健康对照组的阳性率分别为0.3%、36.6%、0%；ASMA在HBV组、AIH组、健康对照组的阳性率分别为0.9%、25.1%、0%；抗LKM-1抗体在HBV组、AIH组、健康对照组的阳性率分别是0.3%、23%、0%；抗SLA/LP抗体在HBV组、AIH组、健康对照组的阳性率分别是0%、2.55%、0%。这些结果表明，HBV组和AIH组ASMA、AMA和抗LKM-1抗体的阳性率均明显高于健康对照组，并且AIH组的阳性率高于HBV组(P < 0.05)。抗SLA/LP抗体在AIH组的阳性率高于HBV组和健康对照组。

两组患者ANA荧光核型分析AIH患者荧光核型以核均质型和核仁型为主；HBV患者颗粒型所占比例较高。见表 3和图 1。

2.3 IAIHG 1999年诊断评分系统对ANA阳性的乙型病毒性肝炎患者评分

由表 4可以看出28例自身抗体阳性乙肝患者中有1例评分超过16分，达到自身免疫性肝炎确诊标准(≥16分)。

3 讨论

自身抗体的检测为自身免疫性疾病的诊断提供有价值的依据^[4-5]。根据自身抗体的不同，自身免疫性肝炎(AIH)可以分为2个亚型，其中Ⅰ型的标志性抗体为抗核抗体(ANA)、抗平滑肌抗体(ASMA)，少数患者抗可溶性肝胰抗原(SLA/LP)抗体阳性。而Ⅱ型为抗肝肾微粒体Ⅰ型(LKM-1)抗体、抗肝细胞胞质Ⅰ型(LC-1)抗体。也有学者将抗可溶性肝胰抗原抗体(抗SLA/LP)阳性的患者，称为第Ⅲ型，目前尚无定论。另外，大量证据表明自身抗体检测在AIH病情判断、预后评估及风险预测方面也体现出重要的临床价值^[6]。

近年来研究证实肝炎病毒的感染常伴随自身免疫表现和/或自身免疫性疾病，免疫耐受机制失衡和淋巴细胞增殖异常相关的肝外体征也经常出现^{[1, 7]}。肝炎患者体内亦常伴随自身抗体的存在，这些抗体可能引发组织病理损伤和器官功能障碍，加重肝炎患者的临床表现^[8-10]。有研究表明^[11]，在慢性乙肝患者中，自身抗体的阳性率可达15%。另一项290例慢性丙肝患者自身抗体的研究显示^[12]，ANA、ASMA和LKM-1的阳性率分别是9%、20%和6%。目前自免肝主要用激素治疗，而干扰素是治疗病毒性肝炎的主要药物，但是它本身有诱发自身免疫性疾病的风险，因此对于自身抗体滴度较高的患者应该禁用或慎用^[13-14]。因此，自身抗体的检测，对病毒性肝炎可能并发的自身免疫性疾病的早期诊断和预防很有必要，而且对于病毒性肝炎临床治疗方案的拟订也同样很有参考价值。

有证据表明AIH与病毒性肝炎可发生重叠感染，并且AIH患者中也可检测到抗病毒性肝炎抗体的存在^[15-16]。本研究对HBV和AIH患者血清自身抗体的特点进行比较分析，发现两组患者均存在多种自身抗体，而且种类相似。但是HBV组AMA、抗LKM-1及抗SLA/LP抗体的检出率均明显低于AIH组。另外，HBV组患者ANA抗体检出率和滴度也比较低，在306例患者中仅28例为阳性(9.1%)，且多数为低滴度1∶100(19/28，67.8%)，而AIH组中，在235例患者中有189例ANA阳性(80.42%)，其中滴度≥1∶320的为135例(135/189，71.43%)，AIH患者以高滴度为主，HB以低滴度(1∶100)为主，高滴度仅见9例患者。

ANA免疫荧光模型包括均质型、颗粒型、核仁型、核点型、核膜型、着丝点等, 不同的核型对应的靶抗原不同，本实验显示AIH患者主要以核均质型(42.3%)、核仁型(31.7%)为主, 而HB患者以颗粒型(42.8%)较常见, 与赵海琳观点一致^[17]。核仁型有随病情的衍变而增高的趋势，提示在慢性肝病衍变过程中自身免疫的变化可能多集中在与细胞增殖、分裂有关的核仁成分上。

ANA阳性的28例乙肝患者只有滴度1∶1000那例患者达到AIH确诊标准。慢乙肝患者血清中检出高滴度的ANA时要结合临床资料排除自免肝，单靠自身抗体结果无法对疾病进行诊断需结合Ig水平和组织学特点进行综合考虑。