现有资料和数据已证实人乳头瘤病毒(human papillomaviruses，HPV)持续感染与女性宫颈炎症和宫颈癌的发生密切相关^{[1, 2, 3]}。HPV的基因分型有超过120种，不同HPV亚型的致病力不同，而各种亚型的分布却存在地域性差异^[4]。本研究通过对重庆地区32 882例女性宫颈HPV感染状况的分析，旨在为本地区的HPV的防治和针对性疫苗研制提供基础实验依据。

筛选的32 882例受检者是2014年1-12月在第三军医大学西南医院妇科门诊、生殖医学中心门诊及健康体检中心接受HPV检测的女性，回顾性收集受检者的临床信息，年龄15～84(39.6±8.3)岁。纳入标准：①重庆地区居住＞10年。②检测前处于非月经期和非妊娠情况。③检测前24 h内无性生活及3 d内未使用阴道内用药物(本研究遵循的程序符合本院人体试验委员会制定伦理学标准，得到该委员会批准并征得受检者的知情同意)。

基因组提取试剂盒、PCR扩增试剂盒、杂交试剂盒(以上均来自广东凯普生物科技股份有限公司)，C-1000 PCR扩增仪(美国Bio-Rad公司)，HybriMax医用核酸分子快速杂交仪(广东凯普生物科技股份有限公司)，BECKMAN ST-16R高速离心机(美国BECKMAN公司)。

用棉拭子擦去宫颈口的分泌物，再用宫颈刷在宫颈口顺时针旋转3～5圈，折断多余的刷柄，将刷头放入含有细胞保存液的标本管中，封闭瓶盖，做好标记，及时送检。

采用凯普公司HPV试剂盒提取和扩增DNA，并用HybriMax杂交仪进行基因分型检测。凯普公司HPV基因型分型检测试剂盒采用基因扩增技术和导流杂交原理检测21种HPV基因，包括15种高危型别：HPV 16、18、31、33、35、39、45、51、52、53、56、58、59、66、68，6种低危型别：HPV 6、11、42、43、44，CP8304(81)。

SPSS 13.0对数据进行统计和分析，χ²检验检测不同年龄组间HPV亚型分布的差异。

32 882例受检者，HPV感染阳性例数为6 313例，总感染率为19.20%。其中感染高危型占81.12% (5 121/6 313)，感染低危型占11.86%(749/6 313)，高、低危型混合感染占7.02% (443/6 313)。在6 313例阳性患者中，以单一亚型感染为主，占80.52%(5 083/6 313)，二重感染占15.18%(958/6 313)，三重感染占3.07%(194/6 313),四重感染占1.01%(64/6 313)，五重感染占0.17%(11/6 313)，六重感染占0.03% (2/6 313)，最多感染型别的是1例8种类型混合感染。

所有的21种HPV亚型均被检测出。HPV高危亚 型占84.40%，检出比例较高的依次为HPV 52(18.90%)、 HPV 16(16.67%)、HPV 58(12.99%)。HPV低危亚型占15.60%，检出比例较高的是HPV CP8304(81)，占7.94%。详细的HPV亚型分布见表 1。

所检测的21种亚型中，各亚型均以单一型感染为主，除HPV 35、42、51、66这4种亚型外，其余17种亚型单一型感染所占的比例均超过了50%。其中，HPV 16、58、52单一型感染所占的比例最高，分别为73.09%、69.16%、68.83%。HPV 35、51、42单一型感 染所占的比例最低，分别为47.92%、40.00%、32.00%。 在多重感染中，三重感染及以上感染例数仅占4.3%，多重感染的主要类型是二重感染，在二重感染中，HPV 52、16、58的感染例数最多，分别为345例、244例、223例，详细情况见表 2。

三类HPV感染类型(高危型，低危型，高、低危混合型)的感染分布情况与年龄有关，按照年龄段将受检者分为7组(≤20、21～30、31～40、41～50、51～60、61～70、≥71岁)，不同年龄段的HPV感染情况不同。7组年龄段的HPV感染类型分布见表 3。HPV高危型感染率各组间比差异有统计学意义(χ²=25.754，P<0.05)。年龄段与高危型感染率呈“U”型分布，而年龄段与高危型感染例数呈反“U”型分布。低危型感染率(χ²=9.480，P=0.148>0.05)和高、低危型混合感染率(χ²=4.676，P=0.586>0.05)，各年龄段间差异均无统计学意义。

宫颈癌是仅次于乳腺癌的女性第2大常见妇科恶性肿瘤，严重危害着女性的生殖健康^[5]。我国每年宫颈癌新增患者约7.5万例，其中约3万例患者死亡^[6]。流行病学已证实高危型人乳头瘤病毒的持续或反复感染在女性宫颈癌及其癌前病变发挥着重要因素。

目前，HPV亚型鉴定已超过120种，不同亚型引起的病变也不同，依据HPV致病性的危险程度不同分为高危型和低危型，高危型HPV常与宫颈、阴道、外阴、肛门、阴茎、口咽等部位恶性肿瘤发生密切相关，低危型HPV与生殖器疣和寻常疣等皮肤良性病变相关^[7]。不同地区HPV总感染率有差异，但基本上都以高危型为主。例如昆明地区HPV总感染率为16.90%，高危型占84.90%^[8]；天津地区总感染率为31.60%，高危型占63.35%^[9]；贵州地区总感染率为34.47%，高危型占85.86%^[10]。本研究中妇女HPV总感染率为19.20%，高危型占81.12%。总之，尽管各地区的总感染率不尽相同，但感染型别都以高危型为主，提示我们要加强对高危型的预防和适龄女性的普查。

多重HPV感染比单一型感染造成的癌前病变风险更高^[11] ，长时间的感染某种HPV会增加感染另一种型别HPV的概率。本研究中HPV多重感染占19.48%，以二重感染为主，主要是HPV 52、16、58于其他型别混合感染，最多例数是这3个亚型相互间的混合感染。这提示这3种型别可能易于相互间感染，但结论需更多地区的数据以进一步研究论证。

HPV各亚型的分布存在地区性差异，Vinodhini 等^[12]研究发现，在较发达地区HPV感染最常见的是HPV16，其次为18、58、52、和31。东亚和东南亚地区HPV主要感染型别依次为16、52、58，南亚和东非地区主要是16、18、31,北美地区主要是16、18、45，西欧地区主要是16、33、51。本研究中HPV感染型别由高到低依次是52、16、58，该结果与东亚和东南亚地区感染型别类似，但与国内其他地区报道有差异，如在河南HPV感染前四位是16、43、58、52^[13]，广西是16、52、58、18^[14]，陕西是16、58、18、33^[15]，这与我国面积幅员广阔与人口众多复杂相关。为预防不同亚型的HPV，然而目前研发上市的HPV疫苗只有Cervarix^TM(英国Glaxo Smith Kline公司)和Gardasil(美国Merck公司)2种疫苗，Cervarix疫苗只能预防HPV16和HPV18，Gardasil疫苗则是HPV 6、11、16、18^[16]。市场上的两种疫苗不能有效预防本地区的HPV的传播，应加强本地区针对性的疫苗研制。

本研究中不同年龄段的高危型HPV感染率呈“U”型分布，低危型和高、低危混合型在不同年龄段HPV感染率也是在≤20岁和≥71岁两个年龄段为感染的高峰。分析认为是青少年HPV较高的感染率与性行为活跃相关，中老年人较高的感染率认为与机体免疫力下降有关。对不同年龄段的感染例数，本研究发现高危型HPV感染例数在不同年龄段呈反“U”型分布，低危型和高、低危混合型感染例数同样是两端少、中间多，即50岁以前的年龄组，感染例数基本呈增加趋势，50岁后年龄组，感染例数迅速减少，这也是王冬等^[17]认为HPV的预防与普查年龄应放在30～50岁。这可能因为女性HPV感染途径主要为性传播，女性患者在绝经期前活跃的性生活，即使接受药物治疗后也极易再次感染，这使感染患者例数累计增多，而绝经后患者性生活急剧减少，药物或手术治疗后却不易再次感染，导致患者例数减少。

HPV感染的分布存在地域性差异，对相关地区HPV感染状况的进行调查和分析，了解HPV基因型分布特点，对本地区宫颈癌的预防和监测以及针对性的疫苗研制有重要意义。